Laboratorien

Gaschromatographische Analysensysteme (GC)

Flüssigkeitschromatographische Analysensysteme (LC)

UPLC-MS/MS System; (Waters Corporation)
Ultrahochauflösende Flüssigkeitschromatographie-Anlage ACQUITY UPLC H-Class (zweidimensionaler Betrieb möglich) mit quarternärer Pumpe (ACQ H-Class QSM Plus), binärer Pumpe (ACQ Binary SOL MGR), Autosampler (ACQ H-Class FTN-H Plus) und Säulenofen (ACQ CM-A) gekoppelt mit einem Tandem Massenspektrometer Xevo-TQ-XS mit Elektrospray-Ionisierung (ESI)-Interface

Spurenanalytik in humanem Probenmaterial (Urin, Blut, Serum, Gewebe)

Es konnte kein Kontakteintrag mit der angegebenen ID 401 gefunden werden.

Es konnte kein Kontakteintrag mit der angegebenen ID 409 gefunden werden.

Diffusionszellsystem

• Franzzellen, (Permegear Europe, SES GmbH Analysesysteme) ummantelte Diffusionszellen, (5 ml Kammervolumen, Expositionsfläche 9 mm Durchmesser)

• Wasserbad (MV-4; Julabo Labortechnik GmbH) zirkulierend, thermostatisch geregelt, temperiert die Franzzelle über die wassergefüllte Ummantelung

• Variomag Multipoint 15 (H+P Labortechnik GmbH) Magnetrührplatte, kontinuierliches durchmischen der Rezeptorlösung der Franzzelle

Mikrodialysesystem

• PHD 2000 Infusion (Harvard Apparatus, Holliston, USA)
• PHD 2000 Programmable (Harvard Apparatus, Holliston, USA)
  Spritzenpumpen, (0,0001 µl/h bis 220,82 ml/min)

Hautzustands-Messung

• Iso-Tech LCR 819 (RS-Components GmbH)
  LCR:  Induktivität (L)  Kapazität (C)  Widerstand (R) elektrische Hautwiderstandsmessung

• MPA 5 (Courage + Khazaka electronic GmbH)
  Tewameter Transepidermaler Wasserverlust
  Corneometer Hautfeuchtigkeit
  Sebumeter Sebum der Hautoberfläche
• Chroma Meter CR-400 (Konica Minolta)
  Reflexionsfarbmessungen und Farbdifferenzmessungen (Kolorimetrie, Messöffnung: 8 mm) Messung der Hautfärbung

Temperatur-Messung

• RDXL6SD Datenlogger für Temperaturen (Omega Engineering GmbH)
  Miniaturtemperaturfühler (Omega Engineering GmbH) intradermale Temperaturmessung
  GOF 500 Universalfühler, Typ K (-65…+500 °C) (Greisinger electronic) Oberflächentemperaturmessung – Kontakt

• Optris®LS Infrarot-Handthermometer (Optris GmbH) Oberflächentemperaturmessung – berührungslos

pH-Messung

• pH-Meter SevenCompact^TM (Mettler-Toledo GmbH)
  Microminiature pH-Elektrode IC 401 (Multi Channel Systems GmbH, a division of Harvard Bioscience, Inc.) intradermale pH-Messung

• Temperature compensation Type 30 K pH-Elektrode (VWR)

Dermatom

• TC-Motor 3000 (Nouvag® GmbH, Konstanz) Mikroprozessor gesteuertes Motorsystem (max. Motordrehzahl: 30.000 Upm)
  Dermatom 25 (Schnittbreite 25 mm; Schnittdicke: 0,5-0,55 mm, 0,05 mm Schritte; max. Motordrehzahl: 8.000 Upm)

Homogenisator/Dispergierer

• Ultra-Turrax T8 (IKA®- Werke GmbH & Co. KG)
  S 8 N- 8G (Durchmesser Stator: 8 mm)

Weitere Labor-Grundgeräteausstattung

Präzisions-Waage:  Analysewaage XA105 DualRange (Mettler-Toledo GmbH)
Magnetrührer, Heizplatte, Vortexer, Kreisschüttler …..

1. Diffusionszell-Methode (nach Franz 1975)

Exzidierte Humanhaut zwischen Expositions- und Rezeptorkammer (mit physiologischer Lösung gefüllt eingespannt (siehe Abbildung 1).  Die Rezeptorkammer wird temperiert und die Hauttemperatur i.d.R. auf 32°C erwärmt.

Abbildung1: Statischen Diffusionszelle nach Franz TJ (Percutaneus absorption. On the relevance of in vitro data. J Invest Dermatol 64:190-195).

Nach Applikation einer Substanz auf die Haut können verschiedene Parameter untersucht werden.

Penetration durch die Haut:

Zu definierten Zeitpunkten kann eine Probe aus der Rezeptorkammer entnommen werden und auf ihren Gehalt an applizierter Substanz analysiert werden.

Penetration in die Haut:

Die eingespannte Haut kann entnommen werden und auf ihren Gehalt an applizierter Substanz analysiert werden.

Hautschädigung:

Die eingespannte Haut kann entnommen werden und ihre Struktur histologisch untersucht werden.

Biochemische Reaktionen:

Zu definierten Zeitpunkten kann eine Probe aus der Rezeptorkammer entnommen werden und auf ihren Gehalt an bestimmten Markern (z.B. Interleukine) untersucht werden.

Metabolische Reaktionen:

Zu definierten Zeitpunkten kann eine Probe aus der Rezeptorkammer entnommen werden und auf ihren Gehalt an, aus der applizierten Substanz gebildete Metabolite untersucht werden

2. Mikrodialyse Technik

Ein Mikrodialyseschlauch wird in exzidierter Humanhaut eingelegt, mit einer Perfusionslösung durchspült und das Perfusat (fraktioniert) gesammelt (Abbildung 2). Substanzen können direkt auf die Haut appliziert werden (Abb. 2a) oder unter Umgehung des Stratum corneum zu exakt definierten Zeitpunkten über die Perfusionslösung direkt in die Haut eingebracht werden (Abb. 2b).

Je nach Fragestellung bietet sich diese Technik als Alternative zur Diffusionszelluntersuchung an.

Abbildung 2: Mikrodialyse-Technik.

Nach Applikation einer Substanz auf die Haut können verschiedene Parameter untersucht werden.

Penetration in die Haut:

Das Perfusat kann über definierte Zeiträume gesammelt werden und auf den Gehalt an applizierter Substanz analysiert werden.

Hautschädigung:

Die Haut kann entnommen werden und ihre Struktur histologisch untersucht werden (Cave: mechanische Schädigung durch das Einlegen des Mikrodialyseschlauchs).

Biochemische Reaktionen:

Das Perfusat kann über definierte Zeiträume gesammelt werden und auf den Gehalt an bestimmten Markern (z.B. Interleukine) untersucht werden.

Metabolische Reaktionen:

Das Perfusat kann über definierte Zeiträume gesammelt werden und auf den Gehalt an, aus der applizierten Substanz gebildete Metabolite untersucht werden.

3. Weitere Untersuchungstechniken

Elektrische Hautwiderstandsmessung

Bestimmung des Transepidermaler Wasserverlust

Bestimmung der Hautfeuchtigkeit

Sebumbestimmung auf der Hautoberfläche

Messung der Hautfärbung

Intradermale pH Wertmessung

Intradermale Temperaturmessung